Klassisk kolonnekromatografi
2. kromatografisk kolonne (rotasjonstype)
3. kromatografisk kolonne (manuell)
*** Prisliste for helhet ovenfor, spør oss for å få
Beskrivelse
Tekniske parametere
Klassisk kolonnekromatografier en grunnleggende separasjonsteknikk som er mye brukt i kjemi og biokjemi for å rense og isolere komponenter fra blandinger . den fungerer på prinsippet om differensiell partisjonering av stoffer mellom en stasjonær fase pakket i en kolonne og en mobil fase som strømmer gjennom den .
Den stasjonære fasen, typisk et fast adsorbent som silikagel eller aluminiumoksyd, er tett pakket i en glass- eller plastkolonne . Prøveblandingen blir introdusert øverst i kolonnen, etterfulgt av tilsetningen av den mobile fasen med en løsningsmiddel eller blanding av Solvents {{2}. Deres kjemiske egenskaper, for eksempel polaritet, størrelse og affinitet for adsorbenten .
Forbindelser med sterkere interaksjoner med den stasjonære fasen beveger seg saktere gjennom kolonnen, mens de med svakere interaksjoner reiser raskere . Denne differensielle migrasjonen resulterer i separasjonen av blandingen til distinkte bånd eller fraksjoner, som kan samles individuelt .
Det er verdsatt for sin enkelhet, allsidighet og kostnadseffektivitet . Det er egnet for både analytisk skala-separasjoner, å identifisere og kvantifisere komponenter og forberedende skala-separasjoner, for å oppnå større mengder og rensede stoffer . til tross for at de er mer avanserte teknikkene som HPLC {{4}. applikasjoner .
Parametere
Grunnleggende prinsipper
|
|
Klassisk kolonnekromatografiOgså kjent som væskesolidkromatografi, er en teknikk for å skille oppløste stoffer basert på forskjellen i distribusjon mellom en stasjonær fase (vanligvis et solid adsorbent) og en mobil fase (løsningsmiddel) . Det grunnleggende prinsippet kan være en oppsummering som følger ved hjelp av den fiksede fasen, løsningen er den løsningen som følger ved hjelp av den fiksede fasen, og den løsningen er til å bli en Ulike distribusjonskoeffisienter mellom den faste fasen og den mobile fasen . I kolonnekromatografi er den stasjonære fasen vanligvis sammensatt av porøs svevestøv (for eksempel silikagel, aluminiumoksyd, aktivert karbon osv. .), som har et stort spesifikt overflateareal og adsorpsjonssenter, og kan danne hydrogen som er binding med rulheter, rulstring av de som er til å rulatere. Løsne molekyler fra den stasjonære fasen, og dens seleksjon bør bestemmes i henhold til polariteten til løst stoffet og adsorpsjonsegenskapene til adsorbenten . I separasjonsprosessen blir blandingsløsningen introdusert i kolonnen som inneholder den stasjonære fasen . med strømmen av mobilfasen, komponentene beveger seg ned i kolonnen i forskjellige hastigheter på grunn av den forskjellige adsorpsjonskapasiteten til den stasjonære fasen {}}}} den mer polariske komponentene er vanligvis å være {.}}. Polaritet blir lett ført bort av mobilfasen, og bevegelseshastigheten er raskere . På denne måten danner hver komponent et antall fargebånd på kolonnen for å oppnå separasjon . |
Aminosyreanalyse
Aminosyreanalyse utføres vanligvis ved bruk av væskekromatografi, hvoravKlassisk kolonnekromatografier en ofte brukt teknikk . I denne metoden brukes ionebytterharpiks som stasjonær fase for å skille aminosyrer i henhold til forskjellen på elektrisk ladning . aminosyrer kan være nødvendig å konverteres til en mer påvisbar form ved derivatisering før prøven kommer inn i kolonnen .}}}}}}}}}}}}}}} kromatografisk kolonne .
- Eksempelpreparat: Proteinprøven hydrolyseres til aminosyrer . Dette kan oppnås ved syrehydrolyse eller enzymatisk hydrolyse . Den hydrolyserte prøven må gjennomgå riktig forbehandling, som fjerning av proteinrester {{{{{{{{{{{{{3}
- Derivatisering: For å forbedre følsomheten til deteksjon av aminosyreanalyser og separasjonsvalgsegenskaper, er aminosyrederivatisering ofte nødvendig . Det er to typer aminosyrededivasjoner: Pre -kolonne -pre -column -døyler, metylseden) Klorofluoren (FMOC-CI), fenylisothiocyanat (PITC), dansylklorid (dansyl-CI), 2, 4- dinitrofluorobenzen (FDNB), etc .
- Kolonnevalg: Velg kolonnen som er egnet for aminosyreanalyse, for eksempel ionutvekslingskolonne, C18 -kolonne, C8 -kolonne, etc .}}
- Kromatografisk tilstandsinnstilling: Angi passende kromatografiske forhold, inkludert mobilfase, strømningshastighet, gradientprogram, etc . Vanlige mobile faser inkluderer buffere som inneholder ionpar, for eksempel formiat buffere .}}}}}}}
- Prøveanalyse: Prøven etter hydrolyse og derivatisering blir injisert i kromatografen for analyse . Ved å sammenligne toppområdet og konsentrasjonen av hver aminosyre i prøven på standardkurven, kan innholdet av aminosyre i prøven kvantitativt analyseres .}}}}}}}}}}}}}}}
- Databehandling: I henhold til toppområdet og konsentrasjonsdata hentet fra analysen, beregnes innholdet i hver aminosyre i prøven, og dataene blir behandlet og resultatet rapporteres .
Det er mange applikasjonseksempler i aminosyreanalyse, og flere spesifikke tilfeller er listet opp nedenfor:
- Påvisning av essensielle aminosyrer: Bruken kan oppdage innholdet av essensielle aminosyrer, for eksempel isoleucin, leucin, lysin osv. . Disse aminosyrene spiller en viktig rolle i menneskekroppen og er viktige for å opprettholde viktig aktivitet og helse .
- Bestemmelse av aminosyrer i kinesisk medisin: I analysen av kinesisk medisin er det også mye brukt for å bestemme innholdet i aminosyrer i kinesisk medisin . For eksempel, når du bestemmer innholdet i Paeoniflorin i Wuji Baifeng -piller, en kolonne med oktadekylsilan som ble brukt for å se på fyllen som en kulere, kan du være en kolonne, en kolonne og en kolonne og en kolonne og en kolonne og en kolonne og en kolonne og en kolonne og en kolonne og en kolonne og en kolonne og en kolonne og en kolonne og en kolonne og en kolonne og en kolonne, en kolonne, en kolonne, en kolonne, en kolonne, en,. syrer .
- Bestemmelse av aminosyrer i mat: aminosyreinnhold i mat er også et av de viktige påføringsområdene . For eksempel, i bestemmelse av nukleotider i spedbarnsmat og meieriprodukter, kan fem nukleotider i melkepulver være isolert og en Column-kolonnet som kan være en column, og en colonn med en C18- t. For å bestemme innholdet av aminosyrer i andre matvarer, som gir et viktig grunnlag for matkvalitetskontroll og ernæringsvurdering .
I aminosyreanalyse er det nødvendig å velge passende derivatiseringsreagenser og derivatiseringsbetingelser for å forbedre følsomheten og nøyaktigheten av deteksjonen .
Valget av kolonne og innstilling av kromatografiske forhold har en viktig innvirkning på separasjonseffekten og må optimaliseres i henhold til den spesifikke prøven og analytiske behov .
I analyseprosessen er det nødvendig å ta hensyn til forberedelses- og lagringsforholdene til prøvene for å unngå påvirkning av prøvekontaminering og nedbrytning på analyseresultatene .
Hva er derivatbehandling
Derivatisering er en viktig prøveforbehandlingsteknikk iKlassisk kolonnekromatografi, som har som mål å forbedre deteksjonsytelsen og separasjonseffekten av analytter . Følgende er en detaljert forklaring av derivatiseringsprosessen:
|
► Formål med derivatbehandling 1) Forbedret deteksjonsytelse: Ved å innføre funksjonelle grupper som er enkle å oppdage, genererer analytten et sterkere signal på detektoren, noe som forbedrer følsomheten og nøyaktigheten til deteksjonen . |
|
|
|
► Type derivatbehandling 1) Avledning før kolonne: |
|
Avledning etter kolonne har fordelene med god reproduserbarhet og mindre påvirkende faktorer, men det krever ytterligere instrumenter og utstyr . 1) Forbedret deteksjonsfølsomhet: For eksempel i aminosyreanalyse kan innføring av lett påviselige funksjonelle grupper (for eksempel fluoroforer) gjennom pre-kolonne derivatisering øke signalstyrken til aminosyrer på detektoren, og derved forbedre følsomheten til deteksjonen . |
|
Klassisk kolonnekromatografi, En grunnleggende teknikk i separasjonsvitenskap, fortsetter å utvikle seg med fremskritt innen materialer og metodikk, og sikrer dens relevans i både forskning og industrielle applikasjoner .
En lovende retning er integrering av nye stasjonære faser . Innovasjoner innen materialvitenskap har ført til utvikling av pakkematerialer med høy yt bioteknologi .
Videre kombineres det i økende grad med avanserte deteksjonsteknikker, for eksempel massespektrometri, for å forbedre følsomheten og nøyaktigheten . Denne hybridiseringen muliggjør mer omfattende analyse av komplekse blandinger, og utvider teknikkens anvendbarhet i felt som metabolom og proteomer {1}
Avslutningsvis ligger fremtiden i sin tilpasning til nye materialer, miniatyrisering og integrasjon med banebrytende deteksjonsmetoder, og sikrer at det fortsatte nytten i moderne vitenskapelige og industrielle landskap .}}
Populære tags: Klassisk kolonnekromatografi, Kina klassisk kolonnekromatografiprodusenter, leverandører, fabrikk
Sende bookingforespørsel
Du kommer kanskje også til å like
