HPLC kolonnekromatografi
2.Kromatografisk kolonne (rotasjonstype)
3. Kromatografisk kolonne (manuell)
*** Prisliste for helhet ovenfor, spør oss for å få
Beskrivelse
Tekniske parametere
HPLC kolonnekromatografi, også kjent som væskekromatografi med høy ytelse (væskekromatografi med høy ytelse), er en kolonnevæskekromatografi med høy separasjonseffektivitet, og er også en viktig gren av kromatografi.
Det skiller komponentene i prøven i henhold til forskjellen i adsorpsjonskraft og partisjonskoeffisient mellom den faste fasen og den mobile fasen. Under et høyt trykkinfusjonssystem, pumpes en mobil fase (vanligvis et enkelt løsningsmiddel eller en blanding av løsningsmidler med forskjellige polariteter) i en kolonne som inneholder en stasjonær fase. Når hver komponent i prøven passerer gjennom kromatogram -kolonnen, på grunn av den forskjellige størrelsen og styrken til interaksjonen med den stasjonære fasen (for eksempel adsorpsjon, distribusjon, eksklusjon, affinitet), er oppholdstiden i den stasjonære fasen også forskjellig, for å oppnå separasjon av hver komponent. De separerte komponentene angir deretter detektoren for deteksjon, og oppnår dermed kvalitativ og kvantitativ informasjon om hver komponent.
Parameter
Bruksområder i farmasøytisk analyse
Anvendelse av HPLC -kolonnekromatografi i medikamentanalyse
Som en viktig separasjonsanalyseteknologi har høyytelsesvæskekromatografi (HPLC) vist stort anvendelsespotensial og verdi innen farmasøytisk analyse siden dens raske utvikling på 1970 -tallet. Ved å kombinere separasjonsprinsippene for klassisk væskekromatografi og gasskromatografi, har HPLC blitt et uunnværlig verktøy i medikamentanalyse for dens effektive separasjon, rask analyse, utmerket deteksjonsfølsomhet og bredt spekter av applikasjoner.
Grunnleggende prinsipper og egenskaper
Den benytter interaksjonen mellom de faste og mobile fasene for gradvis å skille de forskjellige komponentene i blandingen. Den stasjonære fasen kan være et fast stoff eller en væske festet til et fast stoff, mens den mobile fasen er en væske eller en gass. I HPLC tvinges løsningsmidlet gjennom kolonnen ved høyt trykk på opptil hundrevis av atmosfærer, noe som forbedrer separasjonseffektiviteten. I henhold til den forskjellige separasjonsmekanismen kan HPLC deles inn i normal fase HPLC, omvendt fase HPLC, ionutveksling HPLC og volumekskludering HPLC. Hver type har sin spesifikke anvendelsesomfang og separasjonsmekanisme, for eksempel normal fase HPLC for å skille analytter basert på polaritet, og omvendt fase HPLC for å skille ved bruk av hydrofobe interaksjoner.
Egenskapene til HPLC -kolonnekromatografi gjenspeiles hovedsakelig i følgende aspekter:
Høy separasjonseffektivitet: HPLC muliggjør effektiv separasjon av komplekse blandinger takket være høytrykksinfusjonspumper og høye ytelseskolonner.
Høy følsomhet: Moderne detektorer, som ultrafiolett absorpsjonsdetektorer, fluorescensdetektorer, massespektrometri -detektorer, etc., gjør at HPLC har ekstremt høy deteksjonsfølsomhet.
Bredt spekter av applikasjoner: HPLC er ikke begrenset av volatiliteten og den termiske stabiliteten til prøven, og kan analysere termisk ustabile fysiologiske aktive stoffer med høyt kokepunkt og ikke lett å fordampe.
Høy grad av automatisering: De fleste moderne HPLC -instrumenter er utstyrt med automatisk sampler og dataprosessor, som kan realisere automatisering av analyse og rask databehandling.
 |
 |
 |
 |
Spesifikk applikasjon i medikamentanalyse
HPLC kan brukes til medikamentkomposisjonsanalyse for å bestemme de aktive ingrediensene og skadelige urenheter av medisiner. For eksempel, gjennom analyse av flavonoider, alkaloider og andre aktive ingredienser i kinesiske medisinske materialer, kan typene og innholdet i aktive ingredienser bestemmes for å sikre kvaliteten og effekten av medisiner. I tillegg kan HPLC også brukes til medikamentkomposisjonsanalyse i vestlige farmasøytiske doseringsformer, for eksempel injeksjoner, tabletter, kapsler osv. For å sikre at medikamentsammensetningen i stoffet oppfyller de spesifiserte kravene.
HPLC spiller en viktig rolle i bestemmelsen av medikamentkonsentrasjon. Ved å bestemme stoffinnholdet i et medikament, kan stoffets sikkerhet og effektivitet sikres. For eksempel, i analysen av antibiotikamedisin, kan HPLC brukes til å bestemme antibiotikainnholdet i medikamentet for å evaluere den antibakterielle effekten av medikamentet. I tillegg kan HPLC også brukes til å bestemme konsentrasjonen av medisiner i organismer, for eksempel plasma, urin, vev og andre biologiske prøver, for å evaluere effektiviteten og bivirkningene av medikamenter.
HPLC spiller også en viktig rolle i evaluering av stoffkvalitet. Ved å sammenligne de analytiske dataene fra forskjellige partier med medisiner, er det mulig å evaluere om kvaliteten på medisiner er stabil. I tillegg kan HPLC også brukes til å studere effektiviteten og farmakokinetiske egenskapene til nye medisiner, og gi vitenskapelig grunnlag for utvikling og markedsføring av nye medisiner. For eksempel, i fasen av ny medikamentutvikling, kan absorpsjon, distribusjon, metabolisme og utskillelse av nye medisiner hos dyr bestemmes av HPLC, for å forstå effektiviteten og farmakokinetiske egenskapene til nye medisiner, og gi sterk støtte for kliniske studier og markedsføringsapplikasjoner av nye medisiner.
Kirale medisiner refererer til medikamentmolekyler med chirale sentre, og deres enantiomerer kan variere betydelig in vivo -aktivitet, metabolisme og toksisitet. Derfor er det av stor betydning å isolere og bestemme enantiomerer av chirale medisiner. Denne kromatografien spiller en viktig rolle i chiral medikamentanalyse. Ved å introdusere chiral stasjonær fase eller chiral mobilfasetilsetningsstoff, kan chirale medikament enantiomerer skilles og bestemmes effektivt. For eksempel, for optisk aktive aminosyremedisiner, kan forskjellige enantiomerer skilles og bestemmes ved denne kromatografien for å evaluere den biologiske aktiviteten og toksisiteten til stoffet.
Naturlige medisiner kommer fra et bredt spekter av kilder med komplekse sammensetninger og kan inneholde en rekke bioaktive forbindelser. Kolonnekromatografien spiller en viktig rolle i analysen av naturlige medisiner. Ved å optimalisere kromatografiske forhold og velge passende mobilfase, kan effektiv separasjon og bestemmelse av aktive komponenter i naturlige medisiner realiseres. For eksempel ble denne kromatografimetoden brukt til å skille og bestemme de aktive komponentene i kinesisk urtemedisin, for eksempel flavonoider og saponiner, for å forstå deres typer og innhold, og for å gi sterk støtte for kvalitetskontroll, utvikling og utnyttelse av kinesisk urtemedisin.
Fordeler og utfordringer med HPLC -kolonnekromatografi i medikamentanalyse
Den kromatografiske metoden har fordelene med høy separasjonseffektivitet, høy følsomhet, bredt anvendelsesområde og høy grad av automatisering i medikamentanalyse. I praktisk anvendelse står det imidlertid også overfor noen utfordringer. For eksempel er forbehandlingen av prøven veldig krevende for å sikre prøven og stabiliteten til prøven; Høye analytiske kostnader, inkludert instrumentinnsamling, vedlikehold, kromatografisk og mobil faseforbruk; I tillegg, for noen komponenter med sterk polaritet eller stor molekylvekt, kan HPLC kanskje ikke være i stand til å skille seg helt eller oppdage dårlig. Derfor, i praktiske anvendelser, bør den mest passende analysemetoden velges i henhold til kvalitetskravene til spesifikke medisiner og den faktiske situasjonen.
Fremtidsutsikter
Med fremdriften av vitenskap og teknologi og utvikling av høyytelsesvæskekromatografiteknologi, vil dens anvendelse i medikamentanalyse være mer bred. På den ene siden vil utviklingen av nye stasjonære fasematerialer utvide applikasjonsområdet for væskekromatografi med høy ytelse og forbedre separasjonseffektiviteten og selektiviteten. På den annen side vil HPLC -instrumenter være mer intelligente og automatiserte, overvåke kolonnestatus i sanntid gjennom integrerte sensorer, muliggjøre prediktivt vedlikehold, redusere driftsstans og optimalisere eksperimentelle prosesser. I tillegg, kombinert med big data -analyseteknologi, kan systemet automatisk justere driftsparametrene for å samsvare med de beste separasjonsbetingelsene for forskjellige prøver, og forbedre den eksperimentelle effektiviteten og påliteligheten til resultatene. Disse fremskrittene vil gi mer effektive, nøyaktige og pålitelige analyseverktøy for medikamentanalyse, drive utviklingen av medikamentell oppdagelse og kvalitetskontroll.
Oppsummert spiller denne typen kromatografi en viktig rolle i medikamentanalyse og har brede applikasjonsutsikter. Ved kontinuerlig å optimalisere kromatografiske forhold, velge passende mobile og stasjonære faser, introdusere nye deteksjonsteknologier og utstyr, forbedre dens nøyaktighet og pålitelighet i medikamentanalyse og gi kraftigere støtte for medikamentutvikling, kvalitetskontroll og klinisk medikamentbruk.
Fordeler og demerits
Fordel
Effektiv separasjon
HPLC -kolonnekromatografi bruker infusjonspumpe med høy trykk og stasjonær fase med høy effektivitet, noe som gjør kolonneffektivitet mye høyere enn klassisk væskekromatografi, og kan realisere effektiv separasjon av komplekse blandinger.
Høy følsomhet
Utstyrt med høye følsomhetsdetektorer, så som ultrafiolette detektorer, fluorescensdetektorer, etc., kan oppdage lave konsentrasjoner av prøver, noe som er spesielt viktig for sporanalyse.
Mye brukt
Det er ikke begrenset av volatiliteten og den termiske stabiliteten til prøven, og kan analysere det organiske stoffet med høyt kokepunkt, dårlig termisk stabilitet og stor relativ molekylmasse, og har et bredt spekter av bruksområder.
Godt utvalg
Det er mange typer mobilfase, og selektiviteten til separasjon kan forbedres ved å endre type og sammensetning av mobilfase for å oppfylle de analytiske kravene til forskjellige prøver.
Høy grad av automatisering
De fleste moderne HPLC -instrumenter er utstyrt med automatisk sampler og dataprosessor, som kan realisere automatisering av analyse og forbedre effektiviteten i analysen.
Eksempelgjenoppretting er enkelt
Prøven blir ikke ødelagt etter å ha passert gjennom kolonnen, og en enkelt komponent kan samles eller utarbeides, noe som er praktisk for påfølgende eksperimenter eller applikasjoner.
Mangel
Pris- og daglige vedlikeholdskostnader for flytende kromatografer er høye, inkludert utskiftning av kolonner, mobilfaseforbruk og regelmessig kalibrering av instrumentet.
Selv om det er raskere enn klassisk væskekromatografi, er HPLC -analysetider fremdeles relativt lange sammenlignet med gasskromatografi, spesielt for separasjon og analyse av komplekse prøver.
Selv om HPLC -instrumenter er høyt automatiserte, krever drift og vedlikehold av instrumentene fortsatt et visst nivå av kompetanse og erfaring. I tillegg kan forbehandlingen av prøver være komplisert.
På grunn av den irreversible adsorpsjonen av noen forbindelser på den stasjonære fasen, kan det hende at disse forbindelsene ikke blir påvist effektivt, og påvirker dermed nøyaktigheten av analysen.
LC -separasjon påvirkes ofte sterkt av kolonnetemperatur, og konsistente temperaturforhold må opprettholdes for å oppnå repeterbare resultater, noe som øker kompleksiteten og kostnadene for eksperimentet.
Forholdsregler ved bestemmelse av medikamentinnhold
 |
 |
 |
Denne metoden har mange forholdsregler for bestemmelse av medikamentinnhold, noe som er veldig viktig for å sikre nøyaktigheten og påliteligheten av bestemmelsesresultatene. Her er noen viktige hensyn:
Forskjellen på kolonnen vil påvirke retensjonsatferden til stoffet, selv om kolonnelengden, indre diameter, partikkelstørrelse på samme kolonne, på grunn av de forskjellige egenskapene til fyllstoffet, kan retensjonstiden og topptypen på stoffet være veldig forskjellig. Derfor bør den aktuelle kolonnen velges i henhold til egenskapene til stoffet og separasjonsbehovene.
Kolonnen bør opprettholdes regelmessig for å unngå forurensning og blokkering for å sikre dens gode separasjonsytelse.
Buffersalt -pH i mobilfasen har en betydelig effekt på retensjonsatferden til medisiner og kan til og med endre topprekkefølgen til noen medisiner. Derfor, når du optimaliserer mobilfasen, bør spesiell oppmerksomhet rettes mot pH -verdien til buffersaltet.
Sammensetningen av mobilfasen påvirker også separasjonseffekten av stoffet. For eksempel, ved bestemmelse av multivitaminpreparater, vil endringer i det relative forholdet mellom natriumheksanesulfonat og natriumheptansulfonat i mobilfasen påvirke retensjonstiden og toppformen til hver komponent. Derfor bør den aktuelle mobilfasesammensetningen velges i henhold til stoffet og de analytiske behovene.
Prøvehåndteringsprosessen skal sikre representativiteten og stabiliteten til prøven for å unngå nedbrytning eller forurensning av prøven under behandlingen.
Når du veier prøven, skal additive metoden brukes til å veie den på plass på en gang for å sikre nøyaktigheten av veiingen. Samtidig bør veieoperasjonen standardiseres for å unngå lekkasje.
Kvaliteten på referansestoffet har en direkte innflytelse på resultatet av innholdsbestemmelse. Derfor bør kvaliteten på pålitelig, nøyaktig innhold velges.
Kontrollprodukter skal lagres etter behov for å unngå nedbrytning eller forurensning. Hvis kontrollproduktet holdes i kjøleskapet, bør det varmes opp i tørkeovnen før du veier.
Den aktuelle detektortypen skal velges i henhold til arten av medikament- og analytiske behov, for eksempel ultrafiolett detektor, fluorescensdetektor, etc.
Detektoren skal kalibreres med jevne mellomrom for å sikre nøyaktigheten av målesultatene.
Rimelig statistisk analyse av måledataene for å sikre påliteligheten og repeterbarheten til resultatene. For eksempel kan det relative standardavviket (RSD) til toppområdet beregnes for å evaluere presisjonen til måleresultatene.
Når du beregner innhold, bør pålitelige metoder som eksterne eller interne standarder brukes, og lineariteten til standardkurven skal sikres.
Når du etablerer en ny metode for innholdsbestemmelse, bør metodologisk verifisering utføres, inkludert spesifisitet, linearitet, rekkevidde, presisjon, nøyaktighet, holdbarhet og så videre.
Metodologisk verifisering er et viktig middel for å sikre at målemetoden er vitenskapelig, rimelig og pålitelig.
Forsikre deg om at instrumentet forblir stabilt under analyseprosessen, spesielt når du utfører multi-pin-analyse, vær oppmerksom for å observere om responsverdien og toppformen til instrumentet er stabilt.
Hvis unormale data oppstår under analyseprosessen, bør de kontrolleres nøye og elimineres og analyseres om nødvendig.
Populære tags: HPLC kolonnekromatografi, Kina HPLC -kolonnekromatografiprodusenter, leverandører, fabrikk
Sende bookingforespørsel
Du kommer kanskje også til å like
